诊断新案例：父亲用测序技术查明女儿罕见疾病致病基因

　　临床遗传学家Hugh Rienhoff称，9岁大的女儿Bea性格暴躁行为放肆，从生理上看其眼距过宽和上颚后部组织分裂，这些特征据估计很可能是遗传疾病。Bea因无法承担肌肉重量而佩戴支架以支撑纤细的大腿，令Rienhoff忧虑的是，目前健康状况良好的她可能面临严重的心脏疾病。

　　为了查明女儿的病情，生物技术企业家Rienhoff多年来一直四处求医却无果，最终他选择购买仪器自己研究女儿的遗传基因，并成为“亲自去做”生物研究的楷模以及用DNA技术诊断罕见疾病的开拓者。（Nature 449， 773–776; 2007）。

　　Gary Schroth是位于加利福尼亚州圣迭戈的Illumina公司的研发总监，帮助Gary Schroth从基因序列中查找致病线索。他说：“对于个人而言，基因组学提供的信息最多也是查找孩子的致病基因。”

　　近10年来，Rienhoff 通过测序家庭所有成员的部分基因组发现了致病基因——转化生长因子-β3（TGF-β3），其所在的通路控制着胚胎发育、细胞分化和细胞凋亡，而参与该通路的相关基因发生突变后会引起马凡氏综合症和Loeys–Dietz综合症（这两种疾病的症状与Bea的类似）。一篇发表在《美国医学遗传学》（American Journal of Medical Genetics）的论文称，TGF-β3突变或引起Bea的临床表现，而之前并没有将其关联到任何疾病。

　　约翰斯?霍普金斯大学医学院（Rienhoff在此进修遗传学家）的临床医生Hal Dietz在2005年以共同研究者的身份发现了Loeys–Dietz综合症，他认为，TGF-β3途径与疾病的关联是站得住脚的早期假说，因此并不惊讶于该途径中致病基因的发现。

　　Bea求医的经历

　　Rienhoff拜访了许多医学专家（如Dietz）以查明病因，曾在2005年将Bea送往约翰霍普金斯医学院就诊被断定为马凡氏综合症，该疾病类似于由TGF-β受体基因突变所致的Loeys–Dietz综合症（患者平均寿命为26岁，容易患上恶化的心血管并发症），但是医生对已知的致病基因进行测序并未发现突变基因。

　　2008年，Illumina公司首席执行官Jay Flatley为Rienhoff提供了一次测序Bea和家庭其他成员（父母和两个兄弟）转录组的机会。经过遗传数据分析后，Rienhoff和合作者发现Bea继承了父母有缺陷的CPNE1拷贝，这似乎是致病元凶。

　　但是问题依然存在，CPNE1基因并没有明显关联到Bea疾病。对可用的公开基因组数据库研究后发现CPNE1基因的突变频率约是一千分之一，这意味着更多的人会患上和Bea一样的病，而事实并非如此。

　　2009年，Rienhoff带着不满意的答案重回Illumina公司寻求更多帮助，对此该公司开发出外显子组测序技术，用Rienhoff家庭作为测试组并最终发现TGF-β3出现单拷贝突变。在蛙卵细胞培养试验中，TGF-β3缺陷基因生产一种降低TGF-β3途径的无用蛋白，该机制将导致马凡氏综合症和Loeys–Dietz综合症的出现。