父子做亲子鉴定时,通常采用DNA检测的方式。在进行DNA提取前,需要对样本进行处理、保存,然后通过PCR扩增获得目的片段,并进行测序分析,最后得出结论。
1.处理:如果父亲和儿子的毛发样本都比较完整,在采集样本之前要先用剪刀将毛囊周围的表皮剪除,再使用医用酒精消毒皮肤,最后用镊子夹取毛囊放入含有试剂的小试管中,注意一定要浸没于生理盐水中。如果是父亲提供的血痕样本,则应选取干燥无污染的红木棉纱布或脱脂棉上蘸取血液滴入试剂管内,但不能超过标记线,以免液体过多导致失败。
2.PCR扩增:将样本中的DNA与荧光基团结合后,加入到PCR反应体系当中,利用Taq DNA聚合酶作用于引物,使双链DNA解聚为单链,再以4种不同的寡核苷酸探针作为模板,按照碱基互补配对原则,合成两条长度相同的延伸引物,最终形成由4个短的、带有荧光基团的特异序列组成的双链杂交分子。
3.测序分析:当DNA双链杂交分子进入实时定量PCR仪后,会发出荧光信号,其强度取决于两个单链DNA的比例,即亲代DNA占子代DNA的比例越高,产生的荧光信号越强。因此可以通过实时定量PCR仪检测出亲代和子代DNA的比例关系,从而判断是否为父子关系。
4.得出结论:若亲代和子代的荧光信号比值大于设定阈值,则可判定两者存在亲缘关系;反之则不存在。此时可根据基因芯片技术进一步验证鉴定结果,如出现父权指数小于0的情况,则说明该样本不是父亲留下的痕迹。
需要注意的是,父子之间做亲子鉴定的结果一般较为准确,但也可能会受到环境因素的影响而产生误差。建议父子双方前往正规医院的遗传病科就诊,明确自身情况并积极治疗。
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